Conducator
"Oncogenetica"

Zhusina
Iulia Ghenadievna

Absolvent al Facultății de Pediatrie a Universității de Stat de Medicină Voronezh. N.N. Burdenko în 2014.

2015 - stagiu în terapie pe baza Departamentului de Terapie a Facultății al Universității de Stat Medicală Voronezh. N.N. Burdenko.

2015 - curs de certificare în specialitatea „Hematologie” pe baza Centrului de Cercetare Hematologică din Moscova.

2015-2016 – terapeut al VGKBSMP Nr.1.

2016 - a aprobat tema tezei pentru gradul de candidat Stiinte Medicale„studiul evoluției clinice a bolii și al prognosticului la pacienții cu boală pulmonară obstructivă cronică cu sindrom anemic”. Coautor a peste 10 publicații. Participant la conferințe științifice și practice de genetică și oncologie.

2017 - curs de perfecţionare pe tema: „interpretarea rezultatelor cercetare genetică la bolnavii cu boli ereditare.

Din 2017 rezidențiat în specialitatea „Genetică” în baza RMANPO.

Conducator
"Genetica"

Kanivets
Ilya Viaceslavovici

Kanivets Ilya Vyacheslavovich, genetician, candidat la științe medicale, șef al departamentului de genetică al centrului de genetică medicală Genomed. Asistent al Departamentului de Genetică Medicală a Academiei Medicale Ruse de Educație Profesională Continuă.

A absolvit Facultatea de medicină Universitatea de Stat de Medicină și Stomatologie din Moscova în 2009, iar în 2011 - rezidențiat în specialitatea „Genetică” la Departamentul de Genetică Medicală a aceleiași universități. În 2017, și-a susținut teza pentru gradul de candidat în științe medicale pe tema: Diagnosticul molecular al variațiilor numărului de copii ale segmentelor ADN (CNV) la copii cu malformații congenitale, anomalii de fenotip și/sau retard mental folosind oligonucleotide SNP de înaltă densitate. micromatrice»

Din 2011-2017 a lucrat ca genetician la Copii spital clinic lor. N.F. Filatov, departamentul de consiliere științifică al Instituției Științifice Bugetare de Stat Federal „Centrul de Cercetare Genetică Medicală”. Din 2014 până în prezent, a fost responsabil de departamentul de genetică al MHC Genomed.

Domenii principale de activitate: diagnosticul și managementul pacienților cu boli ereditare și malformații congenitale, epilepsie, consiliere genetică medicală a familiilor în care s-a născut un copil cu o patologie sau malformații ereditare, diagnosticare prenatală. În timpul consultării, se efectuează o analiză a datelor clinice și a genealogiei pentru a determina ipoteza clinică și cantitatea necesară de teste genetice. Pe baza rezultatelor sondajului, datele sunt interpretate și informațiile primite sunt explicate consultanților.

Este unul dintre fondatorii proiectului School of Genetics. Face în mod regulat prezentări la conferințe. Predă pentru geneticieni, neurologi și obstetricieni-ginecologi, precum și pentru părinții pacienților cu boli ereditare. Este autor și coautor a peste 20 de articole și recenzii în reviste ruse și străine.

Domeniul de interese profesionale este introducerea în practica clinică a studiilor moderne la nivelul genomului, interpretarea rezultatelor acestora.

Ora recepției: miercuri, vineri 16-19

Conducator
"Neurologie"

Sharkov
Artem Alekseevici

Sharkov Artyom Alekseevici– neurolog, epileptolog

În 2012, a studiat în cadrul programului internațional „Medicina orientală” la Universitatea Daegu Haanu din Coreea de Sud.

Din 2012 - participare la organizarea bazei de date și a algoritmului de interpretare a testelor genetice xGenCloud (https://www.xgencloud.com/, Manager de proiect - Igor Ugarov)

În 2013 a absolvit Facultatea de Pediatrie a Universității Naționale de Cercetare Medicală din Rusia, numită după N.I. Pirogov.

Din 2013 până în 2015 a studiat în rezidențiat clinic în neurologie la Instituția Științifică a Bugetului de Stat Federal „Centrul Științific de Neurologie”.

Din 2015, lucrează ca neurolog, cercetător la Institutul Clinic de Pediatrie de Cercetare Științifică, numit după Academicianul Yu.E. Veltishchev GBOU VPO RNIMU le. N.I. Pirogov. De asemenea, lucrează ca neurolog și medic în laboratorul de monitorizare video-EEG din clinicile Centrului de Epileptologie și Neurologie care poartă numele A.I. A.A. Ghazaryan” și „Centrul de epilepsie”.

În 2015, a studiat în Italia la școala „2nd International Residential Course on Drug Resistant Epilepsies, ILAE, 2015”.

În 2015, pregătire avansată - „Genetica clinică și moleculară pentru medicii practicieni”, RCCH, RUSNANO.

În 2016, pregătire avansată - „Fundamentals of Molecular Genetics” sub îndrumarea bioinformaticii, Ph.D. Konovalova F.A.

Din 2016 - șeful direcției neurologice a laboratorului „Genomed”.

În 2016, a studiat în Italia la școala „San Servolo international advanced course: Brain Exploration and Epilepsy Surger, ILAE, 2016”.

În 2016, pregătire avansată - „Tehnologii genetice inovatoare pentru medici”, „Institutul de Medicină de Laborator”.

În 2017 - școala „NGS în Genetică Medicală 2017”, Centrul Științific de Stat din Moscova

În prezent, el efectuează cercetări științifice în domeniul geneticii epilepsiei sub îndrumarea profesorului, MD. Belousova E.D. și profesor, d.m.s. Dadali E.L.

A fost aprobată tema lucrării pentru gradul de Candidat în Științe Medicale „Caracteristicile clinice și genetice ale variantelor monogenice ale encefalopatiilor epileptice precoce”.

Principalele domenii de activitate sunt diagnosticul și tratamentul epilepsiei la copii și adulți. Specializare restrânsă– tratamentul chirurgical al epilepsiei, genetica epilepsiei. Neurogenetica.

Publicații științifice

Sharkov A., Sharkova I., Golovteev A., Ugarov I. „Optimizarea diagnosticului diferențial și interpretarea rezultatelor testării genetice prin sistemul expert XGenCloud în unele forme de epilepsie”. Genetică medicală, nr. 4, 2015, p. 41.
*
Sharkov A.A., Vorobyov A.N., Troitsky A.A., Savkina I.S., Dorofeeva M.Yu., Melikyan A.G., Golovteev A.L. „Chirurgie pentru epilepsie în leziunile cerebrale multifocale la copiii cu scleroză tuberoasă”. Rezumate ale celui de-al XIV-lea Congres rus „TEHNOLOGII INOVATIVE ÎN PEDIATRIE ȘI CHIRURGIE PEDIATRICĂ”. Buletinul Rus de Perinatologie și Pediatrie, 4, 2015. - p.226-227.
*
Dadali E.L., Belousova E.D., Sharkov A.A. „Abordări genetice moleculare pentru diagnosticul epilepsiei monogenice idiopatice și simptomatice”. Rezumat al XIV-lea Congres rus „TEHNOLOGII INOVATIVE ÎN PEDIATRIE ȘI CHIRURGIE PEDIATRICĂ”. Buletinul Rus de Perinatologie și Pediatrie, 4, 2015. - p.221.
*
Sharkov A.A., Dadali E.L., Sharkova I.V. „O variantă rară a encefalopatiei epileptice precoce de tip 2, cauzată de mutații ale genei CDKL5 la un pacient de sex masculin”. Conferinta „Epileptologia in sistemul neurostiintelor”. Culegere materiale conferinte: / Editat de: prof. Neznanova N.G., prof. Mihailova V.A. Sankt Petersburg: 2015. - p. 210-212.
*
Dadali E.L., Sharkov A.A., Kanivets I.V., Gundorova P., Fominykh V.V., Sharkova I.V. Troitsky A.A., Golovteev A.L., Polyakov A.V. O nouă variantă alelică a epilepsiei mioclonale de tip 3 cauzată de mutații ale genei KCTD7 // Genetica medicală.-2015.- v.14.-№9.- p.44-47
*
Dadali E.L., Sharkova I.V., Sharkov A.A., Akimova I.A. „Caracteristici clinice și genetice și moduri moderne diagnostic de epilepsie ereditară. Culegere de materiale „Tehnologii biologice moleculare în practica medicală” / Ed. membru corespondent RANEN A.B. Maslennikova.- Problema. 24.- Novosibirsk: Academizdat, 2016.- 262: p. 52-63
*
Belousova E.D., Dorofeeva M.Yu., Sharkov A.A. Epilepsia în scleroza tuberoasă. În „Brain Diseases, Medical and Social Aspects” editat de Gusev E.I., Gekht A.B., Moscova; 2016; pp.391-399
*
Dadali E.L., Sharkov A.A., Sharkova I.V., Kanivets I.V., Konovalov F.A., Akimova I.A. Boli și sindroame ereditare însoțite de convulsii febrile: caracteristici clinice și genetice și metode de diagnostic. //Revista Rusă de Neurologie a Copiilor.- T. 11.- Nr. 2, p. 33-41. doi: 10.17650/ 2073-8803-2016-11-2-33-41
*
Sharkov A.A., Konovalov F.A., Sharkova I.V., Belousova E.D., Dadali E.L. Abordări genetice moleculare pentru diagnosticul encefalopatiilor epileptice. Culegere de rezumate „VI CONGRES BALTIC DE NEUROLOGIA COPIILOR” / Editat de profesorul Guzeva V.I. Sankt Petersburg, 2016, p. 391
*
Hemisferotomia în epilepsia rezistentă la medicamente la copiii cu leziuni cerebrale bilaterale Zubkova N.S., Altunina G.E., Zemlyansky M.Yu., Troitsky A.A., Sharkov A.A., Golovteev A.L. Culegere de rezumate „VI CONGRES BALTIC DE NEUROLOGIA COPIILOR” / Editat de profesorul Guzeva V.I. Sankt Petersburg, 2016, p. 157.
*
*
Articol: Genetica și tratamentul diferențiat al encefalopatiilor epileptice precoce. A.A. Sharkov*, I.V. Sharkova, E.D. Belousova, E.L. Dadali. Journal of Neurology and Psychiatry, 9, 2016; Problema. 2doi:10.17116/jnevro20161169267-73
*
Golovteev A.L., Sharkov A.A., Troitsky A.A., Altunina G.E., Zemlyansky M.Yu., Kopachev D.N., Dorofeeva M.Yu. „Tratamentul chirurgical al epilepsiei în scleroza tuberoasă”, editat de Dorofeeva M.Yu., Moscova; 2017; str.274
*
Nou clasificări internaționale epilepsie și crize epileptice ale Ligii Internaționale de Epilepsie. Jurnal de Neurologie și Psihiatrie. C.C. Korsakov. 2017. V. 117. Nr 7. S. 99-106

Conducator
„Diagnostic prenatal”

Kiev
Iulia Kirillovna

În 2011 a absolvit Universitatea de Stat de Medicină și Stomatologie din Moscova. A.I. Evdokimova cu o diplomă în Medicină Generală A studiat în rezidențiat la Departamentul de Genetică Medicală a aceleiași universități cu o diplomă în Genetică

În 2015, ea a efectuat un stagiu de practică în Obstetrică și Ginecologie la Institutul Medical pentru Învățământ Medical Postuniversitar al Instituției de Învățământ Buget de Stat Federal de Învățământ Profesional Superior „MGUPP”

Din 2013, efectuează o întâlnire consultativă la Centrul de Planificare și Reproducere Familială, DZM

Din 2017, este șeful departamentului de Diagnostic Prenatal al laboratorului Genomed.

Realizează în mod regulat prezentări la conferințe și seminarii. Citește prelegeri pentru medici de diferite specialități din domeniul reproducerii și diagnosticului prenatal

Efectuează consiliere genetică medicală pentru gravide cu privire la diagnosticul prenatal în vederea prevenirii nașterii copiilor cu malformații congenitale, precum și a familiilor cu patologii presupus ereditare sau congenitale. Efectuează interpretarea rezultatelor obținute ale diagnosticului ADN.

SPECIALISTI

Latypov
Artur Şamilevici

Latypov Artur Shamilevich – medic genetician de cea mai înaltă categorie de calificare.

După ce a absolvit Facultatea de Medicină a Institutului Medical de Stat Kazan în 1976, timp de mulți ani a lucrat mai întâi ca medic în cabinetul de genetică medicală, apoi ca șef al centrului de genetică medicală. Spitalul Republican Tatarstan, specialist șef al Ministerului Sănătății al Republicii Tatarstan, lector la departamentele Universității de Medicină din Kazan.

Autor a peste 20 lucrări științifice pe problemele geneticii reproductive și biochimice, participant la numeroase congrese și conferințe naționale și internaționale despre problemele geneticii medicale. El a introdus metode de screening în masă a femeilor însărcinate și a nou-născuților pentru boli ereditare în activitatea practică a centrului, a efectuat mii de proceduri invazive pentru bolile ereditare suspectate ale fătului în diferite etape ale sarcinii.

Din 2012, ea lucrează la Departamentul de Genetică Medicală cu un curs de diagnostic prenatal la Academia Rusă de Educație Postuniversitară.

Interese de cercetare – boli metabolice la copii, diagnosticare prenatală.

Ora recepției: miercuri 12-15, sâmbătă 10-14

Medicii sunt internați pe bază de programare.

Genetician

Gabelko
Denis Igorevici

În 2009 a absolvit Facultatea de Medicină a KSMU, numită după. S. V. Kurashova (specialitatea „Medicina”).

Stagiu la Academia Medicală de Educație Postuniversitară din Sankt Petersburg a Agenției Federale pentru Sănătate și Dezvoltare Socială (specialitatea „Genetică”).

Stagiu în terapie. Recalificare primară în specialitatea " Diagnosticarea cu ultrasunete". Din 2016, este angajat al Departamentului de Fundamente Fundamentale de Medicină Clinică a Institutului de Medicină Fundamentală și Biologie.

Sfera de interese profesionale: diagnosticul prenatal, aplicarea screening-ului modern și metode de diagnostic pentru a detecta patologia genetică a fătului. Determinarea riscului de recidivă a bolilor ereditare în familie.

Participant la conferințe științifice și practice de genetică și obstetrică și ginecologie.

Experienta in munca 5 ani.

Consultatie cu programare

Medicii sunt internați pe bază de programare.

Genetician

Grishina
Cristina Alexandrovna

În 2015 a absolvit Universitatea de Stat de Medicină și Stomatologie din Moscova cu o diplomă în Medicină Generală. În același an, a intrat în rezidențiat în specialitatea 30.08.30 „Genetică” la Instituția Științifică a Bugetului de Stat Federal „Centrul de Cercetare Medicală Genetică”.
A fost angajată în Laboratorul de Genetică Moleculară a Bolilor Moștenite Complex (Șef - Doctor în Științe Biologice Karpukhin A.V.) în martie 2015 ca asistent de laborator de cercetare. Din septembrie 2015 a fost transferată în funcție cercetător. Este autorul și coautorul a peste 10 articole și rezumate despre genetică clinică, oncogenetică și oncologie moleculară în reviste ruse și străine. Participant regulat la conferințe de genetică medicală.

Domeniul de interes științific și practic: consilierea genetică medicală a pacienților cu patologie sindromică și multifactorială ereditară.

Consultarea cu un genetician vă permite să răspundeți la următoarele întrebări:

Sunt simptomele copilului semne ale unei boli ereditare? ce cercetări sunt necesare pentru a identifica cauza stabilirea unei prognoze precise recomandări pentru efectuarea și evaluarea rezultatelor diagnosticului prenatal tot ce trebuie să știi despre planificarea familială Consultație de planificare FIV consultații pe teren și online

a participat la școala științifico-practică „Tehnologii genetice inovatoare pentru medici: aplicare în practica clinică”, la conferința Societății Europene de Genetică Umană (ESHG) și la alte conferințe dedicate geneticii umane.

Oferă consiliere genetică medicală familiilor cu suspecte de patologii ereditare sau congenitale, inclusiv boli monogenice și anomalii cromozomiale, determină indicațiile pentru studiile genetice de laborator, interpretează rezultatele diagnosticelor ADN. Consiliază gravidele cu privire la diagnosticul prenatal pentru a preveni nașterea copiilor cu malformații congenitale.

Genetician, medic obstetrician-ginecolog, candidat la științe medicale

Kudryavtseva
Elena Vladimirovna

Genetician, medic obstetrician-ginecolog, candidat la științe medicale.

Specialist în domeniul consilierii reproductive și al patologiei ereditare.

A absolvit Academia de Medicină de Stat Ural în 2005.

Rezidentiat in Obstetrica si Ginecologie

Stagiu în specialitatea „Genetică”

Recalificare profesională în specialitatea „Diagnostic cu ultrasunete”

Activități:

• Infertilitate și avort spontan
Vasilisa Iurievna



Este absolventă a Academiei Medicale de Stat Nijni Novgorod, Facultatea de Medicină (specialitatea „Medicina”). A absolvit stagiul clinic al FBGNU „MGNTS” cu diplomă în „Genetică”. În 2014, a efectuat un stagiu de practică la clinica de maternitate și copilărie (IRCCS materno infantile Burlo Garofolo, Trieste, Italia).

Din 2016, ea lucrează ca medic consultant la Genomed LLC.

Participă regulat la conferințe științifice și practice prin genetică.

Activitati principale: Consultanta in diagnosticare clinica si de laborator boli geneticeși interpretarea rezultatelor. Managementul pacienților și familiilor acestora cu suspiciune de patologie ereditară. Consultanță în planificarea unei sarcini, precum și în timpul sarcinii privind diagnosticul prenatal pentru a preveni nașterea copiilor cu patologie congenitală.

Genetica Interviu cu un expert

Ekaterina Zakharova: „Pentru a evita consecințele grave invalidante, este necesar un diagnostic precoce”

2014-04-17

„Toți stăm pe umerii strămoșilor noștri” - această zicală se aplică nu numai tradițiilor familiei, mentalității, educației, ci și sănătății. Copiii poartă informațiile genetice ale generațiilor anterioare. Din păcate, uneori acest „lanț” eșuează. Ce cauzează acest accident? Cum și ce boli se moștenesc și este posibil să se prezică și să prevină dezvoltarea lor în avans? Despre aceasta și multe altele, conversația noastră cu șeful laboratorului de boli metabolice ereditare al Centrului de Cercetare Genetică Medicală, președintele consiliului de administrație al Societății Ruse de Boli Rare (Orfane) (OMS), doctor în medicină. Științe Ekaterina Iurievna Zaharova.

— Spune-ne, ce face laboratorul tău?
— Laboratorul nostru este unitate structurală Centrul de Cercetare Genetică Medicală. Suntem angajați în diagnosticarea metabolismului. Acesta este un grup destul de mare de patologii, inclusiv 500-600 de boli. Aceste tulburări apar ca urmare a mutațiilor genetice care provoacă o schimbare semnificativă a metabolismului, prin urmare, testele biochimice sunt utilizate pentru diagnosticarea lor împreună cu metode genetice moleculare: diverse studii ale metaboliților, activitatea enzimatică.

În general, abordările de tratament au fost dezvoltate pentru 20-30 de boli metabolice ereditare, inclusiv galactozemie, leucinoză (boala siropului de arțar), tirozinemia, acidurie organică și altele.

- Daca am inteles bine, majoritatea bolilor ereditare sunt incurabile?
- Pentru a vindeca orice boala este necesara eliminarea totala a cauzei acesteia. Cu o boală ereditară, aceasta este o mutație. Singura metodă care o poate elimina este terapia genică. Cu toate acestea, în ciuda așteptărilor mari puse asupra lor terapia genică, această metodă nu a produs încă efecte semnificative. Până în prezent, există doar câteva protocoale aprobate oficial pentru . Particularitatea bolilor metabolice ereditare constă în faptul că unele dintre aceste boli sunt tratabile cu succes, iar pentru multe dintre ele există deja metode eficiente de tratament și corectare, inclusiv dieterapie și nutriție medicală specială, care compensează enzima lipsă. în corpul uman.

În general, abordările de tratament au fost dezvoltate pentru 20-30 de boli metabolice ereditare, inclusiv galactozemie, leucinoză (boala siropului de arțar), tirozinemia, acidurie organică și altele. Terapia de substituție enzimatică este utilizată pentru boala Gaucher, mucopolizaharidoze, boala Pompe, boala Fabry, iar schemele de tratament sunt în curs de dezvoltare pentru o serie de alte boli din acest grup.

„În ciuda speranțelor mari care au fost puse în terapia genică, această metodă nu a produs încă efecte semnificative.”

- De exemplu?
„Exemplul clasic este fenilcetonuria, în care organismului îi lipsește o anumită enzimă care poate descompune și metaboliza moleculele complexe din celulă. În acest caz, tratamentul este respectarea pe tot parcursul vieții la o dietă specifică care limitează numărul de produse care conțin proteine ​​animale. Cel mai important lucru este să începeți dieta la timp. Dacă copilul a început să primească amestecuri specializate în primele zile după naștere, atunci în viitor practic nu va diferi de colegii săi sănătoși. Dacă acest lucru nu se întâmplă, atunci el va dezvolta inevitabil leziuni severe ale centralei sistem nervos, dezvoltarea psihică afectată până la demență.

Pentru a evita consecințele grave invalidante, este necesar să se diagnosticheze boala cât mai devreme posibil. Cea mai promițătoare metodă pentru depistarea precoce a bolilor ereditare este screening-ul neonatal. Inițial, la noi, în programul de screening neonatal au fost incluse 2 boli: și hipotiroidismul congenital. Din 2006, li s-au adăugat încă 3 boli ereditare: galactozemia și sindromul adrenogenital.

De ce ați ales aceste boli specifice? Din câte știu, în SUA, de exemplu, screening-ul neonatal include teste pentru 50 de boli ereditare.
- Există mai multe motive pentru asta. În primul rând, este necesar să înțelegem că screening-ul nu este doar un test pentru definirea unei anumite boli. Acesta este un întreg sistem de activități, care include, pe lângă testare, consiliere familială, oferirea unui tratament unui copil bolnav, monitorizarea constantă a acestuia și așa mai departe. Să presupunem că boala este detectată. Dar cum să tratezi un copil dacă medicamentul sau nutriția specializată necesară pentru el nu este înregistrată în Rusia și poate fi achiziționată doar în străinătate, dacă nu există specialiști care au experiență în gestionarea unor astfel de pacienți? Acestea sunt probleme foarte complexe care trebuie abordate într-un mod complex și treptat.

Initial, in tara noastra, in programul de screening neonatal au fost incluse 2 afectiuni: fenilcetonuria si hipotiroidismul congenital. Din 2006 li s-au adăugat încă 3 boli ereditare: galactozemie, fibroză chistică și sindrom adrenogenital.

O altă problemă majoră este cea financiară. Astăzi, programul de screening neonatal este finanțat de la bugetul federal, dar din 2015 se preconizează transferul acestuia către regiuni. Pentru experți, această situație provoacă o mare îngrijorare. Screeningul neonatal ar trebui să acopere mai mult de 95% dintre nou-născuți, să fie continuu și să fie sub control constant al statului. Numai în acest caz va fi eficient. Și dacă o regiune decide brusc că nu are bani pentru screening? Atunci întregul sistem se va prăbuși pur și simplu și acest lucru nu ar trebui în niciun caz permis. Și sănătatea copiilor este în joc. Experții consideră că ar fi mai logic să păstrăm programul de stat federal.

Și, desigur, screening-ul pentru boli ereditare ar trebui extins, urmând cele mai bune practici mondiale. Primii pași în această direcție sunt deja făcuți. În două regiuni rusești — Moscova și Regiunea Sverdlovsk— a lansat proiecte-pilot pentru screeningul neonatal extins pentru 30 de boli ereditare.

„În primul rând, trebuie să înțelegeți că screening-ul nu este doar un test pentru a identifica o anumită boală. Este un întreg sistem de evenimente"

- Puteți afla dinainte că o persoană are o predispoziție la o anumită boală genetică?
- Există o astfel de metodă - secvențierea genomică. Cu el, genomul fiecărei persoane în parte. Până acum, aceasta este o plăcere destul de costisitoare - costul ei este de aproximativ 10.000 de euro. Se crede că în viitorul apropiat prețul acestei proceduri va scădea de zece ori. S-ar părea că a făcut analiza, și totul se știe. Totuși, aici intrăm în domeniul eticii medicale și al deciziilor aferente. Pot spune un lucru - modern cunoștințe științifice nu este suficient pentru a da un răspuns fără ambiguitate la modul în care anumite schimbări pot afecta calitatea și durata vieții unei persoane, indiferent dacă există mutații genetice la dezvoltarea bolii la această persoană anume.

Aici apare o altă întrebare: cât de necesare sunt astfel de cunoștințe pentru o persoană? De exemplu, există o boală ereditară atât de gravă - coreea lui Huntington, care se bazează pe tulburări neurologice care se manifestă prin mișcări involuntare și nereglementate, ticuri nervoase, spasme. Apoi se dezvoltă schimbări intelectuale, iar o persoană într-o perioadă destul de scurtă de timp se transformă într-un invalid sever. Acest lucru se întâmplă de obicei după 30 de ani. Nu este încă posibil să se vindece această boală, dar este foarte posibil să se determine probabilitatea ca o anumită persoană să dezvolte boala dacă una dintre rudele sale (mama sau tatăl) este bolnavă prin testare. Cu toate acestea, unii oameni, conștienți de riscul potențial, refuză să fie diagnosticați. Este exact ceea ce au făcut cele două surori, fondatoare ale Fundației Huntington Chorea. După ce au făcut o cantitate enormă de muncă pentru a colecta informații, a crea o bancă de biomaterial și a finanțat cercetarea științifică pentru a găsi gena responsabilă de boală, ei înșiși nu au îndrăznit să fie testați. A fost alegerea lor conștientă. Uneori, o persoană pur și simplu nu vrea să știe ce o așteaptă în viitor dacă nu poate schimba nimic.

- Una dintre cele mai controversate probleme discutate de geneticieni din punct de vedere etic este modelarea embrionilor, în care părinții vor putea alege aspectul, caracterul și abilitățile copilului lor nenăscut. Cât de realiste sunt aceste predicții futuriste?
- Odată cu dezvoltarea ulterioară a științei, ele par destul de reale, dar dacă merită să facem acest lucru este o întrebare foarte dificilă. De exemplu, în China nu există interdicții care reglementează testarea genetică. După cum știți, până de curând, familiilor chineze li se permitea să aibă un singur copil. Desigur, mulți părinți au optat pentru băieți. Astăzi, acești copii au crescut, iar societatea se confruntă cu o problemă gravă asociată cu o gravă disproporție de gen: sunt șapte băieți pentru o fată. Drept urmare, mulți tineri pur și simplu nu își găsesc partener.

În China, nu există interdicții care reglementează testarea genetică. După cum știți, până de curând, familiilor chineze li se permitea să aibă un singur copil.

Astăzi, țările UE au adoptat o serie de documente care reglementează testarea genetică. Ei explică clar ce se poate și ce nu se poate face. În special, este imposibil să selectați embrioni pe o anumită bază (culoarea ochilor, sexul și așa mai departe). În plus, în țările europene este interzisă testarea copiilor pentru o boală care a priori este considerată incurabilă. Dacă familia are deja un copil bolnav, atunci testarea celui de-al doilea copil este interzisă când este mic. Acest lucru se face din motive morale și etice - este probabil ca părinții să se concentreze asupra pacientului sau, dimpotrivă, să-și dea toată puterea. copil sanatos, iar drepturile celui de-al doilea vor fi încălcate.

„În țările europene este interzisă testarea copiilor pentru o boală care a priori este considerată incurabilă”

Recent, la unul dintre canalele britanice de televiziune, în program se discuta despre selecția donatorilor pentru transplant de măduvă osoasă. Cu transplant alogen (adică neînrudit), donator Măduvă osoasă administrat unui pacient trebuie să fie genetic cât mai aproape de al lui. Din păcate, nu este întotdeauna posibil să găsiți un astfel de donator. Și apoi părinții apelează la geneticieni, astfel încât mamele să „planteze” un făt care s-ar potrivi acestui copil bolnav ca donator. Cum se procedează într-un astfel de caz? Pe de o parte, părinții vor să salveze viața copilului lor. În același timp, copilul care se naște nu va suferi - îi vor lua sânge din cordonul ombilical și atât. Pe de altă parte, pentru ca el să se nască astfel, procesul de selecție va trebui să distrugă mai mulți embrioni fertilizați. Cum să te raportezi la nașterea unui copil care ar trebui să devină donator, ce se va întâmpla cu psihicul său când va afla despre asta? Revenind la întrebarea dvs. Genetica este încă o știință foarte tânără și astăzi nu știm în ce se poate transforma cutare sau cutare intruziune în această sferă subtilă.

Fiecare dintre noi este purtător al unui anumit număr de mutații „dăunătoare” diferite - de la 20 la 50, conform diferitelor surse.

- Cu alte cuvinte, orice intruziune în procesele naturale este plină de niște consecințe imprevizibile?
Există multe exemple în istoria omenirii când astfel de experimente s-au încheiat cu un eșec total. Dar dacă în Germania experimentele eugenice au încetat imediat după încheierea războiului, atunci în Suedia și alte țări scandinave, modificările corespunzătoare în legislație au fost făcute abia la mijlocul anului 1970. În special, programele de sterilizare a „inferioarelor” (bolnavi). boală mintală, alcoolici, dependenți de droguri). Se credea că sterilizarea forțată ar reduce numărul persoanelor cu anumite caracteristici în populație. Dar nu a ieșit nimic din asta.

- De ce?
- La baza acestei activități a fost o premisă falsă cu privire la rolul determinant al unui factor ereditar. De fapt, acest lucru este departe de a fi cazul. Multe boli sunt poligenice (multifactoriale), adică multe gene sunt responsabile de dezvoltarea lor, își exercită influența și Mediul extern. În plus, mutațiile reapar, iar într-o populație, conform legilor geneticii, frecvența purtătorilor de mutații este destul de constantă. Fiecare dintre noi este purtător al unui anumit număr de mutații „dăunătoare” diferite - de la 20 la 50, conform diferitelor surse. Și, probabil, din punct de vedere al evoluției, acest lucru este necesar pentru ceva.

Deci, în anii 30 ai secolului trecut, s-a emis ipoteza că o boală ereditară atât de gravă ca atunci când învață cum să o trateze poate fi un semn foarte util: sângerarea crescută la tineret va fi compensată de absența trombozei la persoanele în vârstă. . De asemenea, se știe că purtătorii unei alte boli ereditare - anemia celulelor secera sunt rezistente la malarie. Astfel, genotipul nu există de la sine, iar unele trăsături, evaluate ca „dăunătoare” într-un mediu, pot fi destul de utile în altul.

Natura încearcă în mod constant diferite combinații de gene. Trebuie amintit întotdeauna că atunci când o persoană începe să restrângă artificial diversitatea genetică disponibilă, acest lucru poate fi plin de serioase consecințe negative in viitor.

„Se credea că sterilizarea forțată va reduce numărul persoanelor cu anumite caracteristici în populație. Dar nu a rezultat nimic din asta.”

Același lucru este valabil și pentru căsătoriile între rude? În plus, după cum se știe, anumite boli genetice sunt caracteristice unor naționalități și grupuri etnice specifice. Cel mai faimos grup de rudenie în acest sens sunt evreii ashkenazi...
- Oamenii apropiați au șanse mai mari să poarte aceleași alele și, în consecință, în cazul căsătoriilor între rude, riscul ca copiii lor să dezvolte boli ereditare este destul de mare. În ceea ce privește grupurile etnice, diferitele populații se caracterizează prin propriile lor caracteristici genetice. De exemplu, în rândul chuvașilor, osteopetroza este mult mai frecventă decât în ​​alte populații, printre ruși - fenilcetonurie și fibroză chistică, iar printre finlandezi - formă specială epilepsie.

Astfel de trăsături pot apărea la popoarele care au cunoscut o scădere bruscă a numărului și apoi o creștere. Este exact ceea ce s-a întâmplat cu evreii ashkenazi, printre care frecvența purtătorilor anumitor boli genetice este mare. Una dintre cele mai frecvente dintre acestea este boala Tay-Sachs. În populația generală, apare în proporție de 1 la 100.000 de nou-născuți, iar în rândul evreilor ashkenazi, 1 la 3.000. Astăzi, testarea obligatorie pentru purtarea acestei boli se efectuează în Israel. Și această abordare se justifică de la sine: în ultimul an, în țară s-a născut un singur copil cu boala Tay-Sachs. Și a fost o decizie conștientă a părinților, luată din motive religioase. Cunoscând caracteristicile unei anumite populații, geneticienii pot dezvolta programe de screening în masă pentru nou-născuți, testarea purtătorilor și așa mai departe.

Cine vizitează cel mai des centrul dumneavoastră de genetică medicală?
- În primul rând, părinții cu copii care sunt suspectați că au una sau alta boală ereditară. De asemenea, efectuăm diagnostice prenatale pentru a detecta patologia într-un stadiu incipient al dezvoltării intrauterine. Suntem abordați și de persoane care au rude cu boli ereditare pentru a le exclude de la sine.

- Testarea este costisitoare. Statul sprijină cumva centrul în acest sens?
— Nu toată lumea poate plăti pentru un astfel de studiu astăzi. Din păcate, testele genetice complexe nu sunt incluse în prezent în niciunul dintre sistemele de garanții ale statului. Unele boli sunt testate ca parte a cercetării științifice, dar aceasta este o picătură în ocean. Aceste probleme trebuie abordate, desigur. La urma urmei, cu cât se pune un diagnostic mai devreme, cu atât este mai probabil să ajute o persoană, să-și îmbunătățească calitatea vieții și, uneori, doar să o salveze.

- Diagnosticul este urmat de tratament și nu este disponibil pentru toate persoanele cu boli rare (sau „orfane”, după cum sunt numite și acestea). Totul se bazează din nou pe finanțe.
— Vai. Uneori, o persoană merge la medici ani de zile pentru a fi diagnosticată. În ultimii ani, a apărut chiar și termenul „odisee de diagnostic”. Și acum, în sfârșit, diagnosticul este clarificat. Și aici încep noi încercări: există un tratament pentru această boală, dar pacientul însuși nu poate plăti pentru aceasta - este prea scump, iar eliberarea nu este, de asemenea, imediat și nu întotdeauna posibilă.

„Din păcate, testele genetice complexe nu sunt incluse astăzi în niciunul dintre sistemele de garanții de stat”

— Recent, subiectul bolilor rare a fost în audiere. Din 2014, s-a planificat transferul de finanțare pentru programul 7 Nozologii către regiuni, dar sub presiunea publicului, această decizie a fost amânată cu un an. În plus, există și o listă specială, care include 24 de boli rare care pun viața în pericol ...
- Da. Statul, într-un fel sau altul, încearcă să găsească modalități de a oferi acces la terapie pacienților cu boli rare. Astăzi, este încredințat în totalitate regiunilor, iar acestea nu pot face față acestei sarcini.

Pentru a aborda în mod eficient problemele de furnizare a pacienților cu boli rare cu medicamente și nutriție terapeutică, este necesar să se mențină un anumit echilibru între bugetele federale și regionale. Găsirea ei este dificilă, dar posibilă. De exemplu, potrivit experților, luând în considerare diferite nozologii, așa-numita „lista celor 24” include mult mai multe boli, aproximativ 58. Jumătate dintre ele sunt tratate cu terapie dietetică. În comparație cu medicamentele, formulele specializate sunt relativ ieftine, iar regiunile pot suporta cu ușurință această povară financiară. În plus, este adesea necesară achiziționarea de nutriție medicală în regim de urgență, pentru a se asigura că pacienții tineri nou identificați ca urmare a screening-ului neonatal sunt furnizați fără greș și uneori este mai ușor pentru regiune să facă acest lucru. În ceea ce privește restul bolilor rare, este mai logic să le includă în programul „7 nosologii”, deoarece inițial acest program a fost creat tocmai pentru tratamentul.

De exemplu, conform experților, ținând cont de diferite nozologii, așa-numita „lista celor 24” include aproximativ 58 de boli.

- Și aici organizațiile publice de pacienți ar trebui să își spună cuvântul.
„Cu siguranță, pacienții cu boli rare ar trebui să aibă acces la tratament. Iar sarcina noastră ca organizație publică este să îi ajutăm să obțină acest drept la viață. În prezent, observăm tendințe pozitive în luarea deciziilor: opinia publică este ascultată și s-a acordat mai multă atenție problemelor persoanelor cu boli rare. Un Consiliu pentru Protecția Drepturilor Pacienților a fost înființat în subordinea Ministerului Sănătății al Federației Ruse și au fost organizate consilii similare în cadrul ministerelor regionale ale sănătății. Acestea includ, de asemenea, organizațiile publice de pacienți. Datorită acestei lucrări comune sistematice, s-au putut obține anumite rezultate: s-au adus modificări unor legi și reguli, în unele cazuri, pacienții au început să primească terapia necesară.

„Astăzi, finanțarea listei cu 24 de boli rare este încredințată în totalitate regiunilor, iar acestea nu pot face față acestei poverii”

Cu toate acestea, trebuie să avansăm și să contribuim la îmbunătățirea abordărilor privind furnizarea de medicamente pentru pacienții cu boli rare. Este foarte important să se elaboreze criterii transparente și ușor de înțeles pentru formarea listelor de medicamente în programele de finanțare publică. Experții sunt siguri că listele nu trebuie să fie statice, ar trebui să fie actualizate în mod constant, inclusiv ținând cont de apariția de noi boli și de noi opțiuni de tratament pentru boli rare care anterior erau considerate incurabile, cum ar fi scleroza tuberoasă, boala Pompe, criopirină asociată. boli. Există uneori doar câteva zeci dintre acești pacienți în țară, și nu primesc tratament, deoarece aceste boli și medicamente nu sunt incluse în nicio listă.

Știința face posibilă tratarea din ce în ce mai multe boli care înainte erau incurabile. Medicii și pacienții nu își pierd speranța că, cu sprijinul statului, toate metodele eficiente și inovatoare de terapie vor fi disponibile pacienților ruși, indiferent de diagnostic.

Fotografie din arhiva personală a lui E. Zakharova

Intervievat de Irina Tretyakova

Laboratorul bolilor metabolice ereditare a fost creat la Centrul de Cercetare Genetică Medicală în urmă cu mai bine de 30 de ani. Prima lucrare în laborator a fost asociată cu dezvoltarea de teste pentru detectarea fenilcetonuriei și a programelor de screening selectiv pentru bolile metabolice ereditare (HMD). Treptat, laboratorul a trecut la utilizarea metodelor complexe biochimice și genetice moleculare pentru diagnosticul precis al bolilor ereditare. Aici, sub îndrumarea profesorului Xenia Dmitrievna Krasnopolskaya, au fost dezvoltate abordări ale diagnosticului biochimic al bolilor organitelor celulare. Astăzi este singurul laborator din Rusia unde se efectuează diagnosticarea postnatală și prenatală a marii majorități a bolilor din acest grup.

Unul dintre direcții științifice Munca diviziei este de a căuta noi markeri biochimici pentru bolile ereditare, dezvoltarea de noi metode pentru diagnosticarea eficientă a acestora.

Gama de metode biochimice utilizate în laborator este extrem de largă și include: electroforeza glicozaminoglicanilor urinari, izoelectrofocalizarea transferinelor, spectrometria cromato-masă, cromatografia lichidă de înaltă performanță, analiza activității enzimelor lizozomale și mitocondriale folosind substraturi cromogene și fluorogene. și oxigrafie. Unele dintre formele de NBO, nedepistate anterior la noi, au fost diagnosticate în laborator pentru prima dată.

O descoperire semnificativă în diagnosticarea NBO a fost introducerea metodei spectrometriei de masă în tandem, care face posibilă detectarea a aproximativ 30 de forme de boli ereditare din grupele celor mai frecvente NBO în microcantități de material biologic (o pată de sânge uscat sau plasma): aminoacidopatie, acidurie organică și defecte ale β-oxidării mitocondriale.

Anul trecut metodele genetice moleculare sunt dezvoltate activ în laborator. Pentru unele boli din grupul NBO, au fost create protocoale de diagnostic ADN pentru a reduce timpul de stabilire a unui diagnostic și a evita utilizarea metodelor biochimice invazive și consumatoare de timp. Din 2015, laboratorul folosește secvențierea de ultimă generație pentru a analiza mai multe gene simultan. Astfel de panouri sunt concepute pentru boli mitocondriale, boli ereditare cu o leziune primară a ficatului, leucodistrofii/leucoencefalopatii.

Până în prezent, metodele biochimice și genetice moleculare utilizate fac posibilă diagnosticarea a peste 200 de forme diferite de boli metabolice ereditare.

Laboratorul lucrează la caracterizarea spectrului și frecvenței mutațiilor în mucopolizaharidoze ereditare, sfingolipidoze, lipofuscinoza ceroidă neuronală, se dezvoltă algoritmi pentru diagnosticarea bolilor care apar cu afectarea substanței albe a creierului, precum și a altor tulburări neurometabolice ereditare. .

Redare servicii medicale Medicii trebuie să rămână în primul rând ființe umane. Când găsiți la noi un laborator de boli metabolice ereditare, nu uitați să lăsați o recenzie.

Tratamentul trebuie să fie profesional, Laboratorul de Boli Metabolice Ereditare – aici medicii vor oferi servicii de calitate și tratament fără consecințe. Rezervați o întâlnire în câteva minute, recenzii noi.

În orașul dvs. există un Laborator de boli metabolice ereditare recenzii, apelați la serviciile spitalelor și clinicilor, medicii conform datelor verificate. A face o programare la medicii de la Laboratorul de boli metabolice ereditare din Moscova, prin intermediul site-ului nostru a devenit și mai ușoară!

Centrul de Cercetare Genetică Medicală al Academiei Ruse de Științe Medicale. Site-ul web al Laboratorului de boli metabolice ereditare conține informații despre diagnosticul de laborator al bolilor ereditare rare, manifestările clinice ale acestora și opțiunile de tratament. Pe site: spectrometrie de masă în tandem / boli depistate prin TMS / indicații pentru analiza TMS / boli de depozitare lizozomale / reguli pentru prelevarea de sânge / lista de prețuri / trimitere probe pentru analiză / cum să ajungi la noi / link-uri utile

Cum să ajungem acolo

Vă vom ajuta să găsiți cele mai bune oferte medicale și ce spital din Moscova aduc cu CKD de la adresa Katukov19 pentru rudele și prietenii lor.

Indicații rutiere către analiza TMS fără ambuteiaje, cu metroul sau mașina proprie.

Feedback și întrebări

Anna Mignenko, 09.01.2015

Buna ziua. Suntem din Stavropol. Copilul are 3,5 ani. Am consultat un genetician la SKKKDC în ceea ce privește retardul psihomotoriu cu pierderea abilităților dobândite anterior de origine necunoscută și ataxie de origine necunoscută.
Au fost efectuate următoarele. examene:
-studiu citogenetic (cariotip): 46,XX
-test de sânge pentru FA - 0,7 mg%
- TLC de aminoacizi și carbohidrați din sânge - fără patologie
- TLC aminoacizilor din urină: hiperaminoacidurie generalizată!
-analiza urinei: leucocite ++; test pentru acid xanturenic - slab pozitiv.
În condițiile laboratorului NBO s-au efectuat următoarele:
- analize de sânge prin metoda TMS - nu au fost relevate date pentru aminoacidopatie ereditară, acidurie organică și defecte de beta-oxidare mitocondrială;
- Enzimodiagnostic pentru 6 boli de acumulare - nu s-au constatat abateri.
Ni s-a recomandat consultarea Ekaterinei Yurievna Zakharova. Îmi puteți spune, vă rog, cum o putem contacta și face o programare?

Boli metabolice ereditare - o clasă extinsă de boli ereditare umane, inclusiv peste 600 de forme diferite. Numărul de noi forme de boli metabolice și chiar clase este în creștere în fiecare an, numărul publicațiilor legate de posibilitățile de diagnosticare, prevenire și, important, de tratare a bolilor metabolice este în creștere exponențială. Formele separate de boli metabolice sunt rare sau extrem de rare, dar frecvența lor totală este destul de mare și se ridică la 1:3000-1:5000 de născuți vii. O trăsătură caracteristică a acestor boli sunt modificările biochimice pronunțate care apar înainte de apariția primelor simptome clinice.

Conform clasificării biochimice, bolile metabolice sunt împărțite în 22 de grupe în funcție de tipul căii metabolice afectate (aminoacidopatie, tulburări ale metabolismului glucidic etc.) sau în funcție de localizarea acesteia în cadrul unei anumite componente celulare (boli lizozomale, peroxizomale și mitocondriale).

Clasificarea biochimică a bolilor metabolice este următoarea.
Boli de depozitare lizozomiale.
Boli mitocondriale.
boli peroxizomale.
Tulburări congenitale de glicozilare.
Tulburări ale metabolismului creatininei.
Tulburări ale metabolismului colesterolului.
Încălcări ale sintezei de citokine și alți imunomodulatori.
Tulburări metabolice ale aminoacizilor/acizilor organici.
Încălcări ale b-oxidării mitocondriale.
Tulburări metabolice ale corpilor cetonici.
Tulburări metabolice ale grăsimilor și acizilor grași, lipoproteinelor.
Tulburări ale metabolismului carbohidraților și glicogenului.
Tulburări ale transportului glucozei.
Tulburări ale metabolismului glicerinei.
Încălcări ale metabolismului vitaminelor.
Tulburări metabolice ale metalelor și anionilor.
Tulburări ale metabolismului acidului biliar.
Tulburări ale metabolismului neurotransmițătorilor.
Tulburări metabolice ale steroizilor și altor hormoni.
Tulburări metabolice ale hemului și porfirinelor.
Tulburări ale metabolismului purinelor/pirimidinelor.
Tulburări ale metabolismului bilirubinei.

Principalele mecanisme ale patogenezei bolilor metabolice
ACUMULARE SUBSTRAT
Acumularea substratului reacției enzimatice blocate este unul dintre principalele mecanisme de patogeneză în marea majoritate a bolilor metabolice.

În primul rând, aceasta se referă la perturbarea reacțiilor catabolice, cum ar fi defalcarea macromoleculelor mari, aminoacizilor, acizilor organici etc. Dacă substratul acumulat este ușor îndepărtat din celule și concentrația sa în fluidele biologice este de multe ori mai mare decât la nivel homeostatic, echilibrul acido-bazic se poate modifica.(acizi organici in aciduria organica), se acumuleaza in diferite tesuturi (acid homogentizic in alcaptonurie). În unele cazuri, substratul concurează cu compuși similari în timpul transportului prin bariera hemato-encefalică, ducând la epuizarea lor în creier (aminoacidopatie). Dacă substratul acumulat este slab solubil, se acumulează în interiorul celulei, ceea ce declanșează mecanismele morții apoptotice. Una dintre consecințele suplimentare ale acumulării de substrat poate fi activarea căilor metabolice minore, a căror pondere în metabolismul normal este neglijabilă.

Un astfel de mecanism, de exemplu, stă la baza acumulării de acid fenilpiruvic în fenilcetonurie.

Metaboliții acumulați au o mare valoare diagnostică; în unele cazuri, analiza lor cantitativă sau semi-cantitativă face posibilă determinarea cu precizie a formei bolii. Cu acidurie organică și aminoacidopatie, acumulare în cantitati mari compușii solubili în apă în plasma sanguină și urină vă permite să efectuați rapid lor cantitative sau definiție calitativă folosind metode cromatografice de analiză.

INSUFICIENȚA PRODUSELOR DE REACȚIE
Insuficiența produșilor de reacție este al doilea mecanism principal pentru patogeneza bolilor metabolice. Cauză modificări patologice poate exista o insuficiență directă a produsului reacției blocate. De exemplu, într-un defect al biotinidazei, eliminarea biotinei din proteinele dietetice este afectată și manifestari clinice bolile sunt asociate cu lipsa acestei vitamine.

Insuficiența produșilor de reacție în procesul de ciclu al ureei creează o situație metabolică remarcabilă - unii aminoacizi trec de la neesențiali la esențiali. Deci, cu aciduria arginină-succinic, există o încălcare a formării argininei din acid arginina-succinic, ceea ce duce la o deficiență de arginină și ornitină. În unele cazuri, poate exista o deficiență a unui produs mai îndepărtat în acest lanț metabolic, de exemplu, aldosteron și cortizol, cu sindrom adrenogenital,

IZOLAREA METABOLICA
Într-un grup separat, este necesar să se evidențieze bolile asociate cu izolarea metabolică a produsului de reacție. Acesta este principalul mecanism al patogenezei în încălcarea proteinelor purtătoare, care nu sunt enzime, dar sunt implicate în reglarea unei anumite reacții biochimice. Cascada de evenimente metabolice care este declanșată de aceste boli are consecințe similare pentru organism și celulă. Sindromul hiperornitinemie - hiperamoniemie - homocitrulinurie (un acronim pentru cei trei markeri biochimici principali - hiperamoniemie, hiperornitinemie, homocitrulinemie) este asociat cu o încălcare a transportului ornitinei. Ca urmare, există o lipsă de ornitină în interiorul mitocondriilor, ceea ce duce la acumularea de carbamoil fosfat și amoniu.

Este aproape imposibil de identificat un singur mecanism principal de patogeneză, deoarece procesele metabolice sunt strâns legate între ele. De regulă, se observă o combinație a tuturor mecanismelor descrise și, cu fiecare dintre blocurile enzimatice, apar modificări semnificative în întreaga rețea metabolică a celulei.

Diagnosticul de laborator al bolilor metabolice ereditare
Diagnosticul diferențial al bolilor metabolice ereditare depinde în întregime de utilizarea unei game neobișnuit de largi de metode biochimice, fizico-chimice și genetice moleculare. În cele mai multe cazuri, doar o interpretare combinată a tuturor rezultatelor obținute face posibilă determinarea cu exactitate a formei bolii. De regulă, strategia generală de diagnosticare a bolilor metabolice ereditare include mai multe etape.

I - identificarea unei legături defectuoase în calea metabolică prin analiza (cantitativă, semi-cantitativă sau calitativă) a metaboliților.
II - detectarea disfuncției proteice prin determinarea cantității și/sau activității acesteia.
III - clarificarea naturii mutației, adică caracterizarea alelei mutante la nivel de genă.

O astfel de strategie este folosită nu numai pentru rezolvarea problemelor legate de studiul mecanismelor moleculare ale patogenezei bolilor metabolice ereditare, identificarea corelațiilor genofenotipice, este necesară în primul rând pentru diagnosticarea practică a bolilor metabolice ereditare.

Verificarea diagnosticului la nivel de proteină și genă mutantă este necesară atât pentru diagnosticul prenatal, consilierea medicală genetică a familiilor împovărate, cât și în unele cazuri pentru numirea unei terapii adecvate. De exemplu, în deficitul de dehidropteridin reductază, fenotipul clinic și nivelurile de fenilalanină nu vor fi distinse de forma clasică de fenilcetonurie, dar abordările pentru tratamentul acestor boli sunt fundamental diferite. Importanța diferențierii de locus a bolilor metabolice ereditare pentru consilierea genetică medicală poate fi ilustrată prin exemplul mucopolizaharidozei de tip II (boala Hunter). Conform spectrului de glicozaminoglicani excretați, este imposibil să se distingă mucopolizaharidozele de tipurile I, II și VII, dar dintre aceste boli, numai boala Hunter este moștenită în funcție de tipul recesiv legat de X, care este de o importanță fundamentală pentru prognostic. a urmașilor dintr-o familie cu un istoric împovărat. În ceea ce privește diagnosticul prenatal, având date despre forma mucopolizaharidozei (acest lucru poate fi stabilit numai prin studierea activității enzimelor), este posibil să se efectueze diagnosticul prenatal deja în săptămâna 8-11 de sarcină, dacă forma nu este specificată. , apoi abia la a 20-a săptămână. Prioritatea metodelor genetice moleculare este necondiționată în stabilirea transportului heterozigot, precum și în diagnosticul prenatal al bolilor în care enzima mutantă nu este exprimată în celulele vilozităților coriale, de exemplu, în fenilcetonurie, unele glicogenoze și defecte de β-oxidare mitocondrială. .

IDENTIFICAREA VERIGĂRII DEFECTUATE A CALEI METABOLICE
Analiza metaboliților este cel mai important pas în diagnosticarea multor boli din clasa bolilor metabolice ereditare. În primul rând, aceasta se referă la încălcări ale metabolismului interstițial al aminoacizilor și al acizilor organici. Pentru majoritatea acestor boli cuantificarea metaboliții din fluidele biologice vă permit să stabiliți cu exactitate diagnosticul. În aceste scopuri, metodele de analiză chimică calitativă, metodele spectrofotometrice pentru evaluarea cantitativă a compușilor, precum și tipuri diferite cromatografie (strat subțire, lichid de înaltă performanță, gaz, spectrometrie de masă în tandem). Materialul biologic pentru aceste studii este de obicei probe de plasmă sanguină sau ser și urină.

În bolile metabolice ereditare precum tulburările metabolismului energetic, metabolismul carbohidraților și aminoacizilor, analiza compușilor comuni multor căi metabolice (metaboliți cheie) permite diagnosticarea diferențială a bolilor și planificarea unor tactici de examinare ulterioară. Pentru multe grupuri de boli metabolice ereditare, se utilizează analiza semicantitativă pentru a determina concentrația metaboliților. Uneori, o analiză calitativă este primul pas. căutare diagnostică si permite suspectarea cu mare certitudine a unei anumite forme nosologice a bolii sau a unui grup de boli.

TESTE DE URINĂ CALITATIVE ȘI SEMI-CANTITATIVE
Deoarece în multe boli metabolice ereditare există o acumulare de substraturi ale unei reacții enzimatice blocate sau derivații acestora, concentrațiile excesive ale acestor metaboliți pot fi detectate prin teste chimice. analiza calitativa. Aceste teste sunt sensibile, usor de folosit, cu costuri reduse si nu dau rezultate fals negative, iar informatiile obtinute in urma folosirii lor fac posibila suspectarea unor boli metabolice ereditare la un pacient cu grad mare de probabilitate. Trebuie luat în considerare faptul că rezultatele acestor teste sunt afectate de medicamente, suplimente nutritiveși metaboliții lor. Testele de analiză calitativă sunt utilizate în programele de screening selectiv.

Teste calitative
Culoare si miros: leucinoza, tirozinemia, acidemia izovalerica, fenilcetonurie, alcaptonurie, cistinurie, acidurie 3-hidroxi-3-metilglutarica.
Testul Benedict (galactozemie, intoleranță congenitală la fructoză, alcaptonurie). De asemenea, pozitiv în sindromul Fanconi, Diabet, deficit de lactază, administrarea de antibiotice.
Testul cu clorură ferică (fenilcetonurie, leucinoză, hiperglicinemie, alcaptonurie, tirozinemie, histidinemie). De asemenea, pozitiv pentru ciroză hepatică, pleocromocitom, hiperbilirubinemie, acidoză lactică, cetoacidoză, melanom.
Testul dinitrofenilhidrazină (fenilcetonurie, leucinoză, hiperglicinemie, alcaptonurie). De asemenea, pozitiv pentru glicogenoză, acidoză lactică.
testul p-nitroanilinei: acidurie metilmalonica.
Testul sulfitului: lipsa cofactorului de molibden.
Testul acidului homogentisic: alcaptonurie.
Test cu nitrosonaftol: tirozinemia. De asemenea, pozitiv în fructozemie și galactozemie.

METABOLIȚI CHEIE
Pentru multe grupuri de boli metabolice ereditare piatră de hotar Diagnosticul diferenţial de laborator este măsurarea concentraţiei anumitor metaboliţi în diverse fluide biologice (sânge, plasmă, lichid cefalorahidian şi urină). Acești compuși includ glucoză, acid lactic (lactat), acid piruvic (piruvat), amoniu, corpi cetonici b-hidroxibutirat și acetoacetat), acid uric. Concentrația acestor compuși se modifică în multe boli metabolice ereditare, iar evaluarea lor cuprinzătoare face posibilă dezvoltarea algoritmilor pentru diagnosticarea ulterioară de laborator.

lactat și piruvat
Concentrațiile de lactat, piruvat și corpi cetonici sunt cei mai importanți indicatori ai tulburărilor metabolismului energetic. Sunt cunoscute aproximativ 25 de forme nosologice de boli metabolice ereditare, în care există o creștere a nivelului de lactat din sânge (acidoză lactatică).

Acidoza lactică este o afecțiune în care nivelul acidului lactic depășește 2,1 mm. Acidoza lactică primară poate fi asociată cu un deficit de piruvat dehidrogenază (complex de piruvat dehidrogenază), tulburări ale lanțului respirator mitocondrial (marea majoritate a formelor), gluconeogeneză și metabolismul glicogenului. Acidoza lactică secundară se observă în unele acidurie organică, tulburări ale β-oxidării mitocondriale, defecte ale ciclului ureei. Concentrația acestor metaboliți depinde în mare măsură de starea fiziologică (înainte sau după încărcarea alimentară), iar nivelul de lactat este afectat și de activitatea fizică și chiar de stresul asociat procedurii de prelevare a probelor de sânge, în special la copiii mici. Toate acestea trebuie luate în considerare la interpretarea datelor biochimice. Raportul lactat/piruvat din sânge este un criteriu important de diagnostic diferenţial. Biochimic, acest raport reflectă raportul dintre forma redusă și cea oxidată a dinucleotidelor de nicotinamidă din citoplasmă - așa-numita stare oxidativă a citoplasmei.

Corpii cetonici
Corpii cetonici se formează în ficat, sursa lor principală este b-oxidarea acizilor grași. Ele sunt apoi transferate în diferite țesuturi ale corpului. Raportul dintre corpi cetonici 3-hidroxibutirat/acetoacetat reflectă starea redox a mitocondriilor, deoarece raportul lor este asociat exclusiv cu pool-ul mitocondrial de dinucleotide de nicotinamidă. β-hidroxibutiratul este relativ stabil în plasmă, spre deosebire de acetoacetatul, care este rapid degradat. Multe defecte ale β-oxidării mitocondriale se caracterizează prin nivel scăzut corpii cetonici chiar și după înfometare prelungită, care este asociată cu epuizarea producției de acetil-CoA, care este principalul precursor al corpurilor cetonice. În bolile mitocondriale asociate cu defecte ale lanțului respirator mitocondrial, se observă hipercetonemie paradoxală - nivelul corpilor cetonici după o încărcătură alimentară crește semnificativ (în mod normal, se observă o creștere a concentrației corpilor cetonici după foame prelungită).

Amoniu
În bolile metabolice ereditare, procedând în funcție de tipul de decompensare metabolică acută, este important să se determine nivelul de amoniu din sânge. O creștere semnificativă a amoniului din sânge este observată în bolile metabolice ereditare cauzate de încălcări ale ciclului ureei și metabolismul acizilor organici. În aceste boli, concentrația de amoniu crește de la 200 la 1000 de microni. Hiperamoniemia nu este doar un semn important de diagnostic diferențial, ci necesită și măsuri terapeutice urgente, deoarece duce rapid la leziuni grave ale creierului. Este important să se diferențieze această afecțiune de hiperamoniemia tranzitorie neonatală, care apare la nou-născuții prematuri cu indici mari de creștere și masă și simptome clinice afectarea plămânilor. Nivelul de amoniu în această stare nu depășește 200 de microni. Concentrația de amoniu din sânge poate crește odată cu înfrângere severă ficat. Valori normale ale concentrației de amoniu în sânge: în perioada neonatală - mai puțin de 110 microni, la copiii mai mari - mai puțin de 100 microni.

Glucoză
O scădere a nivelului de glucoză din sânge poate fi observată într-o serie de boli metabolice ereditare. În primul rând, aceasta se referă la tulburări ale metabolismului glicogenului și defecte ale β-oxidării mitocondriale, în care hipoglicemia poate fi singura modificare biochimică detectată cu standardul. cercetare de laborator. Răspunsul fiziologic la scăderea nivelului de glucoză din sânge este abolirea eliberării insulinei, producerea de glucagon și alți hormoni de reglare. Aceasta duce la formarea glucozei din glicogen în ficat și la conversia proteinelor în glucoză în lanțul de gluconeogeneză. Lipoliza este, de asemenea, activată, ceea ce duce la formarea de glicerol și acizi grași liberi. Acizii grași sunt transportați în mitocondriile hepatice, unde sunt p-oxidați și se formează corpi cetonici, iar glicerolul este transformat în glucoză în lanțul gluconeogenezei. Copiii au o nevoie mult mai mare de glucoză decât adulții. Se crede că acest lucru se datorează faptului că raportul creier-corp este mai mare la copii, iar creierul este principalul consumator de glucoză.

În plus, creierul adultului este mai adaptat să folosească corpii cetonici ca sursă de energie decât creierul unui copil. Din aceste motive, copiii sunt mai sensibili la afecțiunile hipoglicemice decât adulții. În tulburările metabolismului glicogenului, hipoglicemia este asociată cu incapacitatea de a forma glucoză din glicogen, deci este mai pronunțată în perioadele de post prelungit.

Majoritatea bolilor din grupa defectelor de β-oxidare mitocondrială sunt, de asemenea, însoțite de o scădere a nivelului de glucoză. Acest grup de boli este una dintre cele mai frecvente boli metabolice ereditare. Cauza hipoglicemiei este asociată cu incapacitatea de a utiliza grăsimile stocate în perioada de post și cu epuizarea glicogenului stocat, care devine singura sursă de glucoză și, în consecință, de energie metabolică. Hipoglicemia cu defecte de β-oxidare mitocondrială, spre deosebire de glicogenoze, nu este însoțită de hipercetonemie. Hipoglicemia poate apărea și în galactozemie de tip I, intoleranță ereditară la fructoză, deficit de fructoză-1,6-bisfosfatază.

acidoza metabolica
Acidoza metabolică este una dintre cele mai frecvente complicații ale boli infecțioase, hipoxie severă, deshidratare și intoxicație. Boli metabolice ereditare, care se manifestă precoce copilărie, sunt adesea însoțite de acidoză metabolică cu deficit de bază.

Cel mai important criteriu în diagnostic diferentiat acidoza metabolică este nivelul corpilor cetonici din sânge și urină, precum și concentrația de glucoză. Dacă acidoza metabolică este însoțită de cetonurie, aceasta indică o încălcare a metabolismului piruvatului, aminoacizilor ramificati, tulburări ale metabolismului glicogenului. Defectele de β-oxidare mitocondrială, cetogeneză și unele tulburări ale gluconeogenezei nu sunt însoțite de o creștere a nivelului corpilor cetonici în sânge și urină. Cele mai frecvente boli metabolice ereditare care apar cu acidoza metabolică severă sunt acidemia propionică, metimalonica și izovaleric. Tulburări ale metabolismului piruvatului și ale lanțului respirator mitocondrial, manifestându-se în vârstă fragedă, de regulă, duc la acidoză metabolică exprimată.

Acid uric
Acidul uric este produsul final al metabolismului purinelor. Bazele purinice - adenina, guanina, hipoxantina si xantina - sunt oxidate la acid uric. Acidul uric este sintetizat în principal în ficat, în fluxul sanguin nu este legat de proteine, așa că aproape tot trece prin filtrare în rinichi. O creștere a concentrației de acid uric în urină este strict corelată cu o creștere a nivelului său în plasma sanguină.

Creșterea producției și excreției de acid uric (hiperuricemie și hiperuricozurie) rezultă din hiperactivitate (un fenomen unic printre bolile metabolice ereditare) sau deficiența enzimelor implicate în sinteza de novo a purinelor, economisind căile metabolice ale acestora sau datorită formării afectate de inozină. monofosfat din adenozin monofosfat în ciclul nucleotidelor purinice. Hiperuricemia secundară se observă și în intoleranța ereditară la fructoză, deficitul de fructoză-1,6-defosfatază, glicogenozele de tip I, III, V, VII și insuficiența dehidrogenazei acetil-CoA a acidului gras cu lanț mediu.

ANALIZA METABOLIȚILOR FOLOSIND METODE CANTITATIVE SPECIALE
Metodele cromatografice de analiză joacă un rol important în diagnosticul bolilor metabolice ereditare. Arsenalul modern de tehnologii cromatografice este extrem de larg, ceea ce face posibilă separarea eficientă și informativă a amestecurilor complexe, multicomponente, care includ material biologic. Pentru analiza cantitativă a metaboliților în bolile metabolice ereditare, se folosesc cu succes metode cromatografice precum cromatografia în gaz și cromatografia lichidă de înaltă performanță, cromatografia-spectrometria de masă. Cromatografia de gaze și cromatografia de gaze de înaltă performanță sunt cele mai versatile metode de separare a amestecurilor complexe de compuși, caracterizate prin sensibilitate și reproductibilitate ridicate. În ambele cazuri, separarea se realizează ca rezultat al interacțiunii diferite a componentelor amestecului cu fazele staționare și mobile ale coloanei cromatografice. Pentru cromatografia de gaze, faza mobilă este un gaz purtător, pentru cromatografia de gaze de înaltă performanță, este un lichid (eluent). Ieșirea fiecărui compus este înregistrată de detectorul dispozitivului, al cărui semnal este convertit în vârfuri pe cromatogramă. Fiecare vârf este caracterizat de timp de retenție și zonă. Trebuie remarcat faptul că cromatografia de gaze se efectuează, de regulă, la un regim de temperatură ridicată, astfel încât instabilitatea termică a compușilor este o limitare pentru utilizarea sa. Pentru cromatografia gazoasă de înaltă performanță, nu există astfel de restricții, deoarece în acest caz analiza se efectuează în condiții blânde. Spectrometria de cromatomasă este un sistem combinat de cromatografie gazoasă sau cromatografie gazoasă de înaltă performanță cu un detector selectiv de masă, care permite obținerea de informații nu numai cantitative, ci și calitative, adică se determină suplimentar structura compușilor din amestecul analizat.

acizi organici
În genetica biochimică, termenul „acizi organici” se referă la acizi carboxilici mici (greutate moleculară - mai mică de 300 kDa), solubili în apă, care sunt produse intermediare sau finali ale metabolismului aminoacizilor, carbohidraților, lipidelor și aminelor biogene.

Pentru determinarea acizilor organici sunt utilizate o varietate de metode cromatografice: cromatografie lichidă de înaltă performanță, cromatografie-spectrometrie de masă și cromatografie gazoasă de înaltă performanță, urmată de spectrometrie de masă în tandem. Peste 250 de acizi organici diferiți și conjugați de glicină pot fi găsite într-o probă de urină. Concentrația lor depinde de dietă, medicamente și alte motive fiziologice. Sunt cunoscute aproximativ 65 de boli metabolice ereditare, care se caracterizează printr-un profil specific de acizi organici. Relativ nu un numar mare de acizii organici sunt foarte specifici, prezența lor în concentrații mari în urină permite stabilirea cu precizie a diagnosticului: succinilacetonă în tirozinemia de tip I, N-acetilaspartat în boala Canavan, acid mevalonic în aciduria mevalonic. În marea majoritate a cazurilor, diagnosticul bolilor metabolice ereditare bazat doar pe analiza acizilor organici din urină este destul de dificil de stabilit, prin urmare, este necesar un diagnostic suplimentar, de confirmare.

Interpretarea rezultatelor analizei acizilor organici din urină prezintă anumite probleme, atât din cauza numărului mare de acizi excretați și a derivaților acestora, cât și din cauza profilurilor suprapuse ale unor metaboliți ai medicamentelor. Pentru un diagnostic precis, datele obținute din analiza acizilor organici trebuie să se coreleze cu caracteristica clinica boli și să fie confirmate de rezultatele altora metode de laborator analiză (analiza aminoacizilor, lactatului, piruvatului, acilcarnitinelor în sânge, activitatea enzimatică și datele genetice moleculare).

Concentrația acizilor organici în bolile metabolice ereditare se caracterizează printr-o gamă destul de largă - de la o creștere a nivelului lor de câteva sute de ori până la un exces ușor, aproape de normal. De exemplu, în aciduria glutaric de tip I, nivelurile de acid glutaric pot fi normale la unii pacienți; în caz de insuficiență a acetil-CoA dehidrogenazei cu catenă medie a acizilor grași, concentrația acizilor adipic, sebacic și suberic poate fi în limitele normale. Uneori este posibil să se detecteze un profil anormal al acizilor organici în urină numai la pacienții aflați în stadiul de decompensare metabolică. Acest lucru este valabil mai ales pentru formele benigne, ușoare de boli, care, de regulă, se manifestă târziu.

Aminoacizi și acilcarnitine
Determinarea concentrației de aminoacizi și acilcarnitine se realizează prin spectrometrie de masă în tandem. Spectrometrie de masa - metoda analitica, care poate fi folosit pentru a obține atât informații calitative (structură), cât și cantitative (greutate moleculară sau concentrație) ale moleculelor analizate după conversia lor în ioni. Diferența esențială dintre spectrometria de masă și alte analitice metode fizice si chimice este că spectrometrul de masă determină direct masa moleculelor și fragmentele acestora. Rezultatele sunt prezentate grafic (așa-numitul spectru de masă). Uneori nu este posibil să se analizeze amestecuri complexe, multicomponente de molecule fără a le separa mai întâi. Moleculele pot fi separate fie prin cromatografie, fie prin utilizarea a două spectrometre de masă conectate în serie - spectrometrie de masă în tandem. Metoda spectrometriei de masă în tandem a fost folosită pentru prima dată în anii '70. al secolului trecut și și-a găsit aplicație în chimie, biologie și medicină. Această metodă este utilizată pentru a elucida structura substanțelor necunoscute, precum și pentru a analiza amestecuri complexe cu o purificare minimă a probei.

Înainte de analiza spectrometrică de masă, este necesar să se transforme particulele neutre ale unei substanțe în ioni încărcați, precum și să le transfere dintr-o stare lichidă în stare gazoasă. În acest scop, la început s-a folosit metoda de ionizare prin bombardament rapid cu atomi, mai recent s-a preferat metoda ionizării în electrospray. Odată cu apariția noilor metode de ionizare, utilizarea spectrometriei de masă în tandem în domeniul biochimiei analitice a devenit mai accesibilă. Prima analiză a acilcarnitinelor prin spectrometrie de masă în tandem a fost efectuată de David Millington și colab., care a folosit derivatizarea chimică a probelor biologice pentru a forma esteri butilici ai acilcarnitinelor. În 1993, Donald Chase et al. a adaptat această metodă pentru analiza aminoacizilor din petele de sânge uscat, formând astfel baza pentru screening-ul mai multor componente în bolile metabolice ereditare. De atunci, metoda a fost adaptată la testele pe scară largă necesare pentru screening-ul neonatal.

Analiza spectrometriei de masă în tandem este cea mai eficientă pentru compușii care au ioni fiice similari sau molecule neutre, cum ar fi analiza aminoacizilor și a acilcarnitinelor. De asemenea, este necesar să se sublinieze posibilitatea analizei MS/MS a diferitelor grupe chimice într-o singură analiză pentru foarte un timp scurt(~2 min). Aceasta oferă gamă largă teste și debit mare, care este rentabil pentru screening-ul pentru un număr mare de boli. Pe baza creșterii concentrației anumitor acilcarnitine, se pot suspecta boli din grupul tulburărilor de p-oxidare mitocondrială prin modificarea profilului aminoacizilor - aminoacidopatie. Folosind spectrometria de masă în tandem, este posibil să se detecteze metaboliți străini ai acizilor biliari care apar în tulburările metabolismului colesterolului și lipidelor, acizilor biliari, precum și în defecte ale biogenezei peroxizomilor. Cu diverse tulburări hepatobiliare colestatice ( boala cronica ficat de etiologie necunoscută, sindromul Zellweger, deficit de proteine ​​bifuncționale peroxizomale, tirozinemie de tip I, atrezie biliară, colestază intrahepatică familială progresivă de tip necunoscut) folosind spectrometrie de masă în tandem, este posibilă determinarea concentrației acizilor biliari conjugați în diferite fluide biologice.

Sunt descrise metode pentru determinarea acizilor grași cu lanț foarte lung: eicosanoic (C20:0), docosanoic (C22:0), tetracosanoic (C24:0), hexacosanoic (C26:0), precum și acizii fitanic și pristanic - folosind spectrometria de masă în tandem în petele de plasmă și sânge, potențial adecvată pentru screening-ul pentru multe boli peroxizomale.

Diagnosticul tulburărilor metabolismului purinelor și pirimidinelor (deficit de purin nucleozid fosforilază, ornitin transcarbamilază, molibden cofactor, adenilosuccinază, dehidropirimidin dehidrogenază) se bazează pe prezența metaboliților anormali sau absența metaboliților normali, ai celulelor sanguine sau urinei din ser. Da, dezvoltat metode rapide spectrometrie de masă în tandem, permițând cuantificarea de la 17 la 24 de purine și pirimidine în urină într-o singură analiză.

Spectrometria de masă în tandem poate fi folosită și pentru a studia alte clase de metaboliți. Astfel, a fost dezvoltată o nouă metodă de spectrometrie de masă în tandem pentru măsurarea monofosfatului total de hexoză în petele de sânge, un marker al galactozei-1-fosfat, care poate fi utilizat în screening-ul galactozemiei.

Determinarea catecolaminelor în urină este importantă pentru diagnosticarea tulburărilor metabolismului catecolaminelor și neurotransmițătorilor. Dezavantaje semnificative metodele existente sunteți pentru mult timp analiza și posibila interferență a medicamentelor și a metaboliților acestora similare structural cu catecolaminele. Noile metode în combinație cu prepararea probelor specifice compușilor care conțin grupe catecol permit diagnosticarea rapidă a acestui grup de boli, eliminând deficiențele metodelor HPLC.

Cercetarea proteinelor
Marea majoritate a bolilor metabolice ereditare sunt cauzate de o încălcare a activității enzimelor, prin urmare, în diagnosticarea acestor boli, detectarea unei scăderi a activității enzimelor specifice este cea mai importantă și, uneori, singura metodă fiabilă pentru confirmarea diagnosticului.

DETERMINAREA ACTIVITĂȚII ENZIMELOR
În prezent, diagnosticul post și prenatal al multor boli metabolice ereditare (în primul rând boli de stocare lizozomală) se realizează folosind metode de analiză. activitate enzimatică. Materialul pentru măsurarea activității enzimatice în bolile metabolice ereditare este în primul rând leucocitele din sângele periferic: în aproape toate bolile de stocare lizozomală, aciduria metilmalonică și unele glicogenoze. Plasma sanguină sau serul este utilizat pentru a diagnostica gangliozidozele GM2 și deficitul de biotinidază. În unele cazuri, obiectele de studiu sunt țesutul muscular sau hepatic, cultura fibroblastelor cutanate.

Substraturile pentru enzime pot fi cromogene, fluorogene, conțin o etichetă radioactivă. Pentru măsurarea activității enzimelor se folosesc metode spectrofotometrice, fluorimetrice și de măsurare a radioactivității. Principiu general Utilizarea substraturilor fluorogene este că substratul este un derivat chimic al fluorocromului, incapabil de fluorescență în starea inițială, dar sub acțiunea moleculelor enzimelor corespunzătoare, substratul este scindat catalitic cu eliberarea de fluorocrom, a cărui fluorescență. poate fi măsurat. Metodele spectrofotometrice fac posibilă măsurarea absorbției produselor de reacție enzimatică obținute după introducerea substraturilor cromogene. Pentru multe enzime (de exemplu, dehidrogenaze), produșii de reacție rezultați pot fi cromogeni. Există destul de multe substraturi fluorogene pentru studiul diferitelor enzime: esteraze cu specificitate diferită, peroxidaze, peptidaze, fosfataze, sulfataze, lipaze etc. Substraturile marcate radioactiv sunt utilizate în diagnosticul aciduriei organice, defecte în oxidarea mitocondrială a P. , tulburări ale metabolismului carbohidraților și boli de stocare lizozomală.

Pentru fiecare reacție enzimatică sunt necesare anumite condiții: pH-ul și compoziția amestecului tampon, substrat(i) specific(i), prezența activatorilor și cofactorilor, regim de temperatură etc. Aproape fiecare celulă conține propriul său set de enzime, astfel încât distribuția lor în țesuturi variază considerabil. Multe enzime se găsesc în țesuturi diferite forme(izoenzime). În cele mai multe cazuri, acest lucru se datorează prezenței subunităților polipeptidice, care, atunci când sunt combinate, formează izoenzime diferite. Distribuția izoenzimelor poate varia de la țesut la țesut. Unele enzime se găsesc doar într-un anumit organ sau țesut.

Boli de depozitare lizozomale
Determinarea activității enzimatice este „standardul de aur” pentru diagnosticul de confirmare al bolilor de stocare lizozomală. Substraturile cromogene și fluorogene sunt utilizate pentru a analiza activitatea enzimatică. Substraturile fluorogene pe bază de 4-metilumberifelonă sunt întotdeauna foarte sensibile; cu ajutorul lor, se poate determina activitatea enzimelor chiar și în microcantități de material biologic (pete de sânge uscat). De regulă, activitatea enzimelor la pacienții cu boli de stocare lizozomală este mai mică de 10% din normă, iar testarea biochimică facilitează stabilirea unui diagnostic precis. Există o serie de factori care fac dificilă interpretarea studiilor biochimice. Una dintre ele este prezența alelelor de „pseudo-deficiență”, care duc la modificări ale structurii enzimei și nu permit proteinei să scindeze în mod adecvat substratul artificial in vitro, în timp ce această enzimă nu prezintă o scădere a activității cu un substrat natural. Acest fenomen a fost descris pentru arilsulfataza A, p-galactozidază, p-glucuronidază, a-iduronidază, a-galactozidază, galactocerebrozidază.

Cercetări asupra genelor mutante
Dezvoltarea metodelor de biologie moleculară a reprezentat o adevărată revoluție în domeniul biochimiei clinice. Dezvoltarea protocoalelor standard pentru studii moleculare și automatizarea metodelor utilizate astăzi reprezintă un set complet de abordări diagnostice care poate deveni o procedură de rutină în laboratoarele clinice. Dezvoltarea rapidă a cercetării în domeniul descifrării genomului uman și al determinării secvenței ADN a genelor face posibilă diagnosticarea ADN a diferitelor boli ereditare. În ultimul deceniu au fost utilizate metode de diagnosticare a ADN-ului, analiza structurii genelor normale și a analogilor mutanți ai acestora în bolile metabolice ereditare.

Pentru diagnosticarea ADN a bolilor ereditare, sunt utilizate două abordări principale - diagnosticarea ADN directă și indirectă. Diagnosticul ADN direct este un studiu al structurii primare a unei gene deteriorate și izolarea mutațiilor care duc la o boală. Pentru a detecta daune moleculare în genele care cauzează boli ereditare, utilizați arsenalul standard al metodelor de biologie moleculară. În funcție de caracteristicile și tipurile de mutații, prevalența la diferite boli ereditare este de preferat o metodă sau alta.

Pentru diagnosticarea bolilor metabolice ereditare în cazurile în care defectul biochimic este cunoscut cu precizie, ușor și sigur determinat prin metode biochimice, este puțin probabil ca metodele ADN să ocupe un loc prioritar. În aceste cazuri, utilizarea analizei ADN este mai mult o cercetare decât o abordare diagnostică. După un diagnostic precis stabilit, metodele de analiză a ADN-ului vor fi utile pentru diagnosticul prenatal ulterior, identificarea purtătorilor heterozigoți în familie și prognosticul bolii la homozigoți, precum și pentru selectarea pacienților pentru terapie ocazională în viitor (înlocuire enzimatică și terapie genică). ). De asemenea, în cazurile în care defectul biochimic nu este cunoscut cu exactitate, diagnosticul biochimic este dificil, insuficient de fiabil sau necesită metode invazive cercetare, metoda diagnosticului ADN este singura și indispensabilă pentru un diagnostic precis.

LA vedere generala tactica de diagnosticare a bolilor metabolice ereditare în fiecare caz specific ar trebui să fie planificată împreună cu un biochimist și un genetician. Condițiile necesare pentru un diagnostic de succes și rapid sunt înțelegerea etiologiei, mecanismele patogenezei bolii și cunoașterea markerilor biochimici specifici.

Controlul calității în laborator
Una dintre cele mai importante componente ale oricărui diagnostic de laborator este controlul constant al calității cercetării. Într-o zonă atât de complexă și cu mai multe fațete precum bolile metabolice ereditare, controlul extern și intern al calității este de o importanță deosebită. Acest lucru se datorează faptului că laboratorul se ocupă de boli rare și, de regulă, câștigă experiență în diagnosticarea fiecăreia dintre bolile din suficient nu pare posibil. În plus, echipamentele de laborator și abordările metodologice pot diferi între laboratoare.